2024, 42(2):135-140.
摘要:
摘 要:目的 探讨流体剪切力(FSS)作用下成骨细胞生物学功能及分化机制。方法 4 组大鼠成骨细胞分别施
加 0、30、60 和 120 min FSS(12 dyn/cm2
)刺激,免疫荧光染色后观察FSS刺激成骨细胞不同时间后的细胞骨架变化,采
用Image J软件计算细胞分形维数,比较细胞内部复杂程度;使用Ca2+试剂盒检测钙响应,碱性磷酸酶(ALP)测试盒检
测ALP活性;Real-time PCR检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osterix(Osx)基因表达;Western blot
检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osx蛋白表达水平,采用Quantity one进行光密度分析。结果 12
dyn/cm2
FSS刺激成骨细胞可引起细胞骨架形态、微丝丰富度及细胞复杂程度的变化,以 60 min最明显。与 0 min组相比,
细胞Ca2+浓度在FSS刺激 30 min后明显升高,延续至 60 min为高峰平台期(P<0.05),120 min 后Ca2+浓度回落;60 min
组的BMP2、Runx2、Osx基因和蛋白表达水平均明显上调(P<0.01);ALP活性升高,在刺激 60 min时最为明显(P<0.05)。
结论 12 dyn/cm2
FSS刺激能改善成骨细胞生物学功能,促进BMP2、Runx2、Osx基因及其蛋白表达上调;能通过改变成
骨细胞骨架促进Ca2+浓度升高,进而激活与分化高度相关的BMP2-Runx2-Osx信号通路,提高成骨细胞分化标志物ALP
活性。